α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
α-KGDH(EC 1.2.4.2)广泛存在于动物、植物微生物和培养细胞的线粒体中,是三羧酸循环调控关键酶之一,催化 α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅酶 A。
测定原理:
α-KGDH 催化 α-酮戊二酸、NAD+ 和辅酶 A 生成琥珀酰辅酶 A、 二氧化碳和 NADH,NADH 在 340 nm 有特征吸收峰,以 NADH 的生成速率表示 α-KGDH 活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
试剂一:50mL×1瓶,-20℃保存;
试剂二:10mL×1瓶,-20℃保存;
试剂三:1mL×1支,-20℃保存;
试剂四:液体55.5mL×1瓶,4℃保存;
试剂五:粉剂×1支,4℃保存;
试剂六:粉剂×1支,4℃保存;
试剂七:粉剂×1支,4℃保存;
试剂八:粉剂×1支,4℃保存;
试剂九:粉剂×1支,-20℃保存;
试剂十:粉剂×1支,-20℃保存;临用前加入2.1mL蒸馏水充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
工作液的配制:临用前把试剂五、试剂六、试剂七、试剂八和试剂九转移到试剂四中混合溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
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