乙酰化低密度脂蛋白属于化学修饰型脂蛋白,是将天然低密度脂蛋白载脂蛋白B的赖氨酸残基做乙酰化修饰之后得到的产物,修饰之后,脂蛋白失去和经典LDL受体结合的能力,但可以被细胞表面清道夫受体识别结合,该特性让
乙酰化低密度脂蛋白成为研究清道夫受体功能、内皮细胞、巨噬细胞生物学特征的重要工具,广泛应用于动脉粥样硬化相关体外细胞实验中。
天然低密度脂蛋白来自人源血浆,生理状态下负责胆固醇转运,依靠细胞膜表面LDL受体完成胞内摄入。当发生乙酰化修饰,蛋白表面赖氨酸残基被乙酰基团修饰,分子识别特征发生改变,不再被LDL受体识别,转而可以和内皮细胞、巨噬细胞、小胶质细胞表面清道夫受体结合,通过受体介导内吞进入细胞内部,促使胞内脂质积累,诱导细胞向泡沫样状态转变。基于这一特性,乙酰化低密度脂蛋白,尤其是荧光标记版本,经常被用来标记、鉴定混合细胞群当中的血管内皮细胞、巨噬细胞、内皮祖细胞,还可以借助流式设备完成对应细胞类群的分选工作,在原代细胞分离培养相关实验场景中有着较多使用。
商品化人源乙酰化低密度脂蛋白,原料取自健康人血浆,原料会完成HCV、HIV相关病原体筛查,保障生物安全,依靠超速离心完成脂蛋白纯化,成品为无菌乳状液体,收到产品后,科研人员可以直接用PBS缓冲液或者细胞培养基稀释使用。荧光标记的乙酰化低密度脂蛋白进入细胞之后,脂蛋白组分被溶酶体酶降解,而荧光染料会富集在胞内膜结构上,产生稳定荧光信号,借此反映细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取水平。每一批次荧光标记产品,还会使用牛大动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞完成标记特异性检测,保证不同批次实验结果可以稳定复现。
样本储存条件为2‑8℃避光存放,不可冻存,在该储存条件下,产品有效期为六周。采用冰袋方式完成产品运输。稀释后的乙酰化低密度脂蛋白工作液稳定性弱,需要现配现用,不建议长时间存放。储存过程中出现沉淀,低速离心两分钟去除沉淀即可继续使用。进行全部操作时,实验人员需要佩戴一次性手套,做好生物样本操作防护。
乙酰化低密度脂蛋白和氧化低密度脂蛋白存在明显差异,乙酰化仅对载脂蛋白做化学修饰,几乎不会发生脂质过氧化,而氧化低密度脂蛋白会发生脂质过氧化,还会带来细胞毒性效应。科研人员开展课题的时候,要区分两者生物学特点,当研究目标聚焦清道夫受体通路本身、细胞鉴定分选,乙酰化低密度脂蛋白更加合适;如果需要模拟体内氧化损伤病理状态,则优先选择氧化低密度脂蛋白系列产品,按需选择对应材料,匹配自身实验假设与研究方向。