考马斯亮蓝法蛋白含量测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/96S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理:
在酸性溶液中,考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物;该复合物在620nm处有 吸收峰, 其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。该方法灵敏度高,适合微量蛋白质分析。
自备仪器和用品:
离心机、酶标仪、96孔板、移液器和蒸馏水。
样品中可溶性蛋白质提取:
1.液体样品:澄清液体样品可以直接测定。
2.组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:20的比例(建议称取约0.05 g组织,加入1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水))
冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即待测液。(动物样品常常需要稀释)
3.按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后8000g,4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。
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