姬姆萨染色液的使用步骤和日常注意
姬姆萨染液是由天青与伊红组成。各种细胞成分化学性质不同,对各种染料的亲和力也不一样。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,被染成粉红色;嗜碱性颗粒如细胞核蛋白或淋巴细胞胞浆为酸性物质,与碱性染料美蓝或天青结合,被染成紫蓝色;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色。各类成分由于自身特性与姬姆萨染液中不同物质结合呈现不同颜色从而得以区分。
我公司配制的姬姆萨染色液以进口的姬姆萨色素染料为原料配制而成,可将细胞核染成紫红色或蓝紫色,胞浆染成粉红色,在光镜下呈现出清晰的细胞染色图像。主要用于显示血涂片中各种血细胞形态大小差异,染色效果好、染色力强、着色清晰。
姬姆萨染色液使用步骤
配制工作液
取姬姆萨10×原液1ml,加入9ml稀释液/去离子水/磷酸盐缓冲液,混匀后即为工作液。工作液建议现用现配。
制备涂片
按常规方法制备血涂片或骨髓涂片,涂片应厚薄适宜、分布均匀,自然晾干。
甲醇固定
待血膜干燥后,用甲醇固定2~3分钟。
滴染
将涂片放在染色架上,滴加配好的姬姆萨工作液,使其覆盖血膜,室温染色15~30分钟。
冲洗
用自来水从玻片一端缓慢冲洗。注意不要先倒掉染液,也不要让水流直接冲击血膜,以免染料沉淀附着或细胞脱落。
晾干镜检
自然晾干后观察。典型结果为:细胞核呈紫红色或蓝紫色,胞浆呈粉红色。
注意事项
现配现用:工作液不宜久置,最好每次染色前新鲜配制。
原液避免进水:姬姆萨10×原液保存和取用时不要接触水,否则容易失效。
pH影响明显:载玻片应清洁、无酸碱污染;冲洗用水宜接近中性,否则染色可能偏红或偏蓝。
染色深浅可调节:若染色过深或过浅,可适当缩短/延长染色时间,或调整工作液浓度。
冲洗要轻柔:这是影响结果的关键步骤,水流过大或冲洗过久可能导致细胞脱落或颜色过浅。
涂片质量很重要:血膜过厚、过薄或不均匀都会影响染色和观察。
安全防护:操作时穿实验服、戴一次性手套,避免染液接触皮肤和衣物。
保存条件:原液一般室温保存,密封避光;不同批次和包装可能略有差异,具体以索莱宝对应产品说明书为准。
