操作
革兰氏阳性细菌鉴定卡21342,每一步规范操作都会直接影响菌种鉴定准确度,下面和你梳理完整标准流程。
试剂日常需2~8℃冷藏保存,取用前提前拿出室温复温15至20分钟,切勿使用过期、破损、渗漏的鉴定卡。菌株必须选用18~24小时新鲜纯菌落,若平板存在杂菌,务必重新分离纯化,混合菌直接上机极易造成鉴定错误。
准备12×75mm无菌塑料管,加入3mL0.45%~0.50%无菌氯化钠溶液。使用无菌拭子挑取形态一致的菌落,充分研磨混匀制成菌悬液,借助校准完成的比浊仪调节浊度,控制在0.50~0.63麦氏单位。悬液配制完成后30分钟内上机,长时间放置会出现菌体沉降,改变菌液浓度。
随后将鉴定卡与菌悬液试管一同装入卡架,连接进样管路,启动仪器填充程序,依靠负压将菌悬液吸入鉴定卡微孔。填充结束检查卡片各微孔无气泡、填充完整,出现大量气泡需要重新制备样本复测。扫描录入标本信息,确认卡片型号匹配无误,放入仪器孵育仓。
仪器自动维持37℃恒温孵育,全程最长约8小时读取生化反应结果。孵育期间不要随意开启舱门、挪动卡架,避免温度波动干扰生化底物反应。结果出具后,优先结合菌落形态、革兰染色结果综合判读,相似度偏低的菌株建议补充生化试验复核。
实操里有几点常见误区需要留意:不要使用生理盐水以外的稀释液;浊度偏高或偏低都会引发生化反应异常;操作全程做好无菌防护,防止标本交叉污染。试验同步落实质控,定期使用标准菌株开展性能验证。测试结束后按照生物安全规范处置鉴定卡与剩余菌液,做好操作记录,保障检测流程可追溯。