用其林贝尔XW-80A对大肠菌群的探讨

粪大肠菌群与大肠菌群相似，主要以其检出情况来判断食品是否受到粪便污染。粪便中既有正常肠道菌，也可能有肠道致病菌(如沙门氏菌、志贺氏菌、霍乱弧菌、副溶血弧菌等)。因此，食品受到粪便污染就对食用者造成潜在的危害。通常情况下，粪大肠菌群与大肠菌群相比，在人和动物粪便中所占的比例较大，而且由于粪大肠菌群在自然界容易死亡等原因，该菌群的存在可认为食品直接或间接受到了近期的粪便污染。

1 材料与方法 

1.1 材料与设备 

1.1.1 实验材料 

大肠埃希氏菌(Escherichia coli)：ATCC25922，美国ATCC标准菌株库；月桂基硫酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤、EC肉汤培养基：北京陆桥技术股份有限公司；无菌生理盐水(0.85%NaCl)、无菌1mol/L NaOH、无菌1mol/LHCl。 

1.1.2 仪器设备 

LRH-150恒温培养箱：郑州生元仪器有限公司；SHA-C恒温水浴箱：常州诺基仪器有限公司；BXM-30R高压蒸汽灭菌器：上海博讯实业有限公司医疗设备厂；SW-CJ-2D超净工作台：沪净净化公司；JY 5002电子天平：上海良平仪器仪表有限公司；HN-08均质器：上海汗诺仪器有限公司；XW-80A振荡器：海门市其林贝尔仪器制造有限公司。 

1.2 检测方法 

1.2.1 国标方法(GB 4789.39—2013) 

将25 g(mL)检样加入225 mL稀释液，均质，10倍系列稀释，选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，接种LST肉汤管，每管接种1 mL(如接种量需要超过1 mL，则用双料LST肉汤)，(36±1)℃培养24～48 h，产气管进行复发酵试验，取培养物1环，移种于EC肉汤管中，(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h，计EC发酵管阳性管数，查MPN表报告结果。 

1.2.2 改进方法

将25 g(mL)检样加入225 mL稀释液，均质，10倍系列稀释，选择适宜3个连续稀释度的样品匀液，直接接种EC肉汤管，每管接种1 mL(如接种量需要超过1 mL，则用双料EC肉汤)，(44.5±0.2)℃水浴培养(24±2)h，计EC发酵管阳性管数，查MPN表报告结果。

2 结果与讨论

准备3份不同浓度大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)菌液，分别为低(0.36 MPN/mL)、中(9.3 MPN/mL)、高(110 MPN/mL)3个浓度值，分别使用国标方法和改进方法重复7次检测粪大肠菌群。对20个实际瓜子样品进行粪大肠菌群检测，国标方法与改进方法的阳性发酵管数存在不一致情况；国标方法检测瓜子中粪大肠菌群阳性检出率为45%，改进方法检测瓜子中粪大肠菌群阳性检出率为40%；整体趋势上，改进方法测得结果略低于国标方法，但改进方法测得结果均在国标方法95%置信区间内。

3 结论 

改进后检测方法与当前国标方法相比，改进方法检测数值相关系数为r=0.943，P=0.000，均在95%置信区间内，统计学意义上无显著区别。国标方法(GB 4789.39—2013)分为LST肉汤初发酵和EC肉汤复发酵两个过程，操作步骤较复杂，工作量较大，干扰因素多，需要经过48～72 h培养后才能得到测定结果，在进行大批量瓜子样品检测时耗时较长[12-13]；改进方法是直接进行一步EC肉汤发酵过程，简单、快捷、经济、高效，可在24 h内得到测定结果，可用于实际瓜子样品大批量时的检测。

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