荧光素钾作用机制：
在有氧环境下，荧光素在荧光素酶和Mg??的催化作用下与ATP发生反应，生成荧光素-AMP复合体并释放出焦磷酸(PPi)。随后，荧光素-AMP复合体在O?的作用下进一步生成氧化荧光素，同时释放出CO?和H?O。在这个过程中，激发态的氧化荧光素返回到基态时会发出光子。
荧光素钾使用方法：
体外生物发光检测
用无菌蒸馏水溶解D-荧光素钾盐，配制成一定浓度的储存液（如15mg/mL），混匀后立即使用，或分装于-20℃或-80℃避光保存（仅限冻融1次），避免反复冻融。然后用预热好的培养基将储存液稀释至合适的工作液浓度（如0.15-0.3mg/mL）。去除细胞培养基后，待图像分析前向细胞培养板内添加工作液，37℃孵育5-10min，然后进行图像分析。
体内活体成像
用无菌的DPBS（w/o Mg??、Ca??）配制储存液，用0.2?m滤膜过滤除菌。立即使用，或分装于-80℃避光保存（仅限冻融1次），使用时4℃融化，实验前平衡至室温（避光）。可通过腹腔注射、静脉注射等方式按特定剂量注入动物体内，注射入体内10-15min（待光信号达到稳定平台期）后进行成像分析。
荧光素钾储存条件
优先推荐于-80℃（若实验室无-80℃冰箱，可使用-20℃）避光储存，有效期12个月；复溶后的储备液推荐分装避光冻存于-80℃，仅限冻融1次，尽量在3个月内使用；工作液推荐现配现用。
荧光素钾注意事项
注射方式、动物类型以及体重等都会影响信号的发射，因此建议每次实验都要做荧光素酶动力学曲线，确定最佳信号平台期和最佳的检测时间。
如果要进行ATP的检测，尽量避免外源ATP的污染，如操作时戴手套并使用ATP-free的实验耗材，在进行荧光素的溶解时应使用ATP-free无菌水。
本品要进行避光操作和保存。储存液过滤除菌后可分装于-20℃或-80℃冻存。
在进行D-荧光素钾盐的溶解时，应使用无钙镁离子的DPBS，因钙镁离子可能会抑制荧光素酶的活性，此外镁离子可能会对荧光素的氧化造成影响，从而影响检测。
为了安全和健康，操作时应穿实验服并戴一次性手套。
