紫外分光光度计的工作原理基于朗伯-比尔定律，通过测定物质对特定波长紫外可见光的吸收程度来进行定性和定量分析。以下是其工作原理的具体介绍：
1.光源提供光谱
光源类型：紫外可见分光光度计使用不同类型的光源来覆盖所需的光谱范围。在紫外区通常使用氢灯或氘灯，而在可见区则使用钨灯或卤钨灯。这些光源能够提供足够强度的连续光谱，确保样品在不同波长下的吸收特性可以被准确测量。
光源稳定性：光源的稳定性是保证测量准确性的关键因素之一。稳定的光源可以确保在测量过程中光谱的一致性，从而减少误差。
2.单色器选择波长
色散元件：单色器中的色散元件（如棱镜或光栅）将光源发出的复合光分解成单一波长的光。这一步骤是实现高精度测量的基础，因为不同物质对不同波长的光有不同的吸收特性。
所需波长的选择：根据被测物质的特性，选择合适的波长进行测量。例如，某些化合物在紫外区有较强的吸收，而另一些可能在可见区有特征吸收峰。
3.吸收池盛放样品
材质选择：吸收池通常由石英或玻璃制成，前者适用于紫外到可见区，后者仅适用于可见区。这是因为石英对紫外光具有良好的透过性，而普通玻璃则会吸收紫外光。
设计要求：吸收池的设计要求其底及两侧为毛玻璃，另两面为光学透光面，以减少光的反射损失。此外，吸收池的光学面必须垂直于光束方向，以确保测量的准确性。
4.紫外分光光度计检测器检测光强
光电转换：检测器的功能是将透过吸收池的光信号转换为电信号。常用的光电转换元件包括光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器等。
信号处理：转换后的电信号经过放大和处理后，可以用于进一步的数据分析和显示。现代紫外可见分光光度计通常配备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等设备，以便实时显示和记录测量结果。
5.信号处理器分析数据
数据处理：信号处理器负责接收来自检测器的电信号，并将其转换为吸光度值。这些数据随后用于计算样品的浓度或其他相关参数。
结果显示：最终的测量结果可以通过数字显示或图形方式呈现给用户。高级仪器还可以提供自动记录和打印功能，方便数据的保存和后续分析。
