超临界流体色谱柱的分离效果主要受到以下几个因素的影响。温度的影响。超临界流体的物理性质会随温度的改变而发生变化。温度的升高可以增加流动相的扩散能力，加快分离速度。其次，填充物的选择也影响到分离效果。不同的填充物具有不同的表面性质，能够对不同极性的化合物产生不同的吸附懈解吸作用。最后，流速也影响到分离结果。较高的流速能够提高分离速度，但也可能降低分离效果。超临界流体色谱柱的使用步骤如下：
1.预处理：按照厂商要求进行预处理。以去除残留的有机物等污染物。
2.装柱：将已预处理的色谱柱连接到色谱系统中，注意连接的严密性。
3.进样：按照所需分析样品的要求，选择相应的进样方式，如进样注射器进行进样。
4.流动相选择：根据分析目标，选择合适的超临界流体作为流动相，并添加适量的修饰剂(如酸、碱、添加剂)以调控分析条件。
5.柱温控制：超临界流体柱具有较宽的工作温度范围，可以根据需要进行温度控制，以优化分离效果。
