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PCR荧光定量检测试剂盒的使用方法

2024年09月29日 17:26:36      来源:明通甄选 >> 进入该公司展台      阅读量:9

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  PCR荧光定量检测试剂盒引物是PCR特异性反应的关键,PCR产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。
  PCR荧光定量检测试剂盒的使用方法:
  一、稀释PCR阳性对照(以10E2-10E7拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)
  1.注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的DNA段作为阳性对照。
  2.标记6个离心管,分别为7,6,5,4,3,2。
  3.用带芯枪头分别加入45μL荧光PCR模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
  4.在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照,充分震荡1分钟,得1×10E7拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  5.换枪头,在6号管中加入5μL 1×10E7拷贝/μL的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  6.换枪头,在5号管中加入5μL 1×10E6拷贝/μL的阳性对照到5号管中,充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的阳性对照。放冰上待用。
  7.重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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