NADP磷酸酶(NADPase)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
NADPase主要存在于植物组织中,是生物体内 催化NADP+降解为NAD+的酶,与NADK一起调控NAD和NADP之间的平衡。
测定原理:
NADPase能够催化NADP+水解为NAD+和无机磷的反应,通过测定无机磷的量来测定NADPase活性。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体30 mL×1瓶, 4℃保存。
试剂二:粉剂×5支,-20℃保存;用时每支加入1 mL试剂一充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂三:粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃可保存一周。
试剂四:粉剂×1瓶, 4℃保存。用时加入25mL蒸馏水,溶解后4℃可保存一周。
试剂五:液体 25mL×1 瓶,室温保存。
试剂六:10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶,4℃保存。
0.5μmol/mL 标准磷应用液配制:将试剂六20倍稀释,即取 0.5mL试剂六加9.5蒸馏水,充分混匀。
定磷试剂的配制:按H2O: 试剂三:试剂四:试剂五=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷试剂
应为浅黄色,若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。
注 意: 配试剂 用新的烧杯、玻棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
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