β-葡萄糖苷酶(β-GC)/纤维二糖酶测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
β-GC(EC 3.2.1.21)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,催化β-糖苷键水解,具有多方面生理作用:在纤维素的糖化作用中,β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖;β-GC水解萜烯类香气前驱体,使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味;β-GC能够水解植物体内野黑樱苷,释放HCN,从而防止昆虫取食。测定原理:
β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基,后者在400nm有 吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。粗酶液提取:
1、培养细胞:先收集或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万或细胞加入1mL提取液),超声波破碎或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。2、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10
的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。15000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、培养液、血清(浆)等液体样本:直接检测。
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