参数规格:
产品名称:地龙染料法PCR鉴定试剂盒价格
英文名称:Pheretima
货号:YSP8648
产品规格:50次
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
适用范围【参考值】
1.试剂盒有效性判定:
(1)阳性对照:有典型S型扩增曲线或Ct值≤35。
(2)阴性对照:Ct值>38或无Ct值,线形为直线或轻微斜线,无指数增。
2.标本结果判定:
(1)阳性:标本检测结果Ct值≤35或有明显指数增。
(2)可疑:标本检测结果Ct值在35~38范围内。此时应对标本进行重复检测,如重复实验结果Ct值仍在35~38范围内,有明显指数增,则判定为阳性,否则为阴性。
(3)阴性:标本检测结果Ct值>38或无Ct值。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μ
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。好设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
PCR反应的特异性决定因素为:
①引物与模板DNA特异正确的结合;
②碱基配对原则;
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性;
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
红色低盖,匹配500MLZPA和230ZSS玻璃瓶,φ31.418.6 3-羟基-2-萘酰基-邻-氧基苯胺4,7-二溴-2,1,3-苯并噻二唑Human GSP(Glycosylated Serum Protein) ELISA Kit
Human GSTα1(Glutathione S Transferase Alpha 1) ELISA Kit
950p塑料瓶,用于盛装固体,白色,供货商型号BP-84,φ89.5178 2-氧烯三氟磺酸Human GSTα4(Glutathione S Transferase Alpha 4) ELISA Kit
Human GSTα5(Glutathione S Transferase Alpha 5) ELISA Kit
275p塑料瓶,用于盛装固体,白色,供货商型号BP-06,φ63.6110.5 异基烯基醚预胶化淀粉Human GSTθ1/GSTt1(Glutathione S Transferase Theta 1) ELISA Kit
Human GSTθ2/GSTt2(Glutathione S Transferase Theta 2) ELISA Kit
150p塑料瓶,用于盛装固体,白色,供货商型号BP-10,φ51.895 N-(2-氰基)-N-羟基苯胺牡荆素鼠李糖苷Human GSTκ1(Glutathione S Transferase Kappa 1) ELISA Kit
Human GSTμ2/GSTm2(Glutathione S Transferase Mu 2, Muscle) ELISA Kit
黑色瓶盖,匹配2ml棕色螺纹玻璃瓶,φ12.59.2 磺酸异酯磷酸二钾Human GSTω1(Glutathione S Transferase Omega 1) ELISA Kit
Human GTF2A1(General Transcription Factor IIA, Polypeptide 1) ELISA Kit
黑色瓶盖,匹配3ml棕色螺纹玻璃瓶,φ15.710.2 癸二酰肼1-(3,4-基)Human GUCA2A(Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit
Human GUCA2B(Guanylate Cyclase Activator 2B) ELISA Kit
500p塑料瓶,用于盛装固体,白色,供货商型号BP-69,φ75137.7 5-硝基糠醛二酸酯1-(3,4-基)Human HAGH(Hydroxyacylglutathione Hydrolase) ELISA Kit
Human HBβ(Hemoglobin Beta) ELISA Kit
42MM口径透气不透液盖 中孔直径2MM 配套500ml氟化瓶使用 N-基-N-羟基苯胺Human HBμ(Hemoglobin, Mu) ELISA Kit
Human H-Cadherin(Cadherin, Heart) ELISA Kit
硫酸 USP级 3-(N,N-二基氨基)烯酸酯1-(2,3-二苯基)盐酸盐Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit
Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit
硫酸 BC 二酸二异酯7-羟基-3,4-二-2(1H)-喹啉酮Human Hepc(Hepcidin) ELISA Kit
Human Hepc25(Hepcidin 25) ELISA Kit
地龙染料法PCR鉴定试剂盒价格 二蓝硫酸镍铵,六水 CP,98.0%保安制服 冬装Orexin B (mouse, rat)
钽试剂(BPHA)苯酰胺 CP一次性滴管 3ml加长型 200mmOrphan GPCR SP9155 Agonist P518 (human)
铍试剂Ⅰ苯酰胺 99%1-基-2,3-二基咪唑四氟硼酸盐 97%Orphan GPCR SP9155 Agonist P550 (mouse)
硼试剂苯酰胺 99.5%,升华纯化1-基-3-基咪唑双三氟磺酰亚胺盐 98%Osteocalcin (1-49) (human)
高铁试剂硫酸联氨 CP,98.0%1-基-3-基咪唑硫酸盐 95%Osteocalcin (7-19)(human)
络合剂拧盖机 SG-1550型手持式1-基-3-基咪唑双氰胺盐 97%Osteocalcin (37-49)(human)
酚试剂(MBTH)钢板铡刀1-基-3-基咪唑硝酸盐 95%(Tyr38,Phe42•46)-Osteocalcin (38-49) (human)
达旦黄移动白板架 240120加厚型单面磁性白板配加厚型双杠1-基-3-基咪唑六氟磷酸盐 97%Neurokinin B
偶氮胭脂红G(+)-樟脑酸 99%N4-苯酰基-2'-脱氧胞苷 98.0 %Biotinyl-Neurokinin B
丽春红BS双(4-)磷酸酯 99%盐酸环胞苷 98%(N-Me-Phe7)-Neurokinin B
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