鳞癌VX-2(兔模型)5×10^5以上/1ml
对于大多数细胞研究工作者来说,鳞癌VX-2(兔模型)污染那可是个糟糕的事情,也是比较容易出现的情况,我们如何防范,如何避免,是我们要学习和掌握的。
人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒 Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA试剂盒 96T/48T
人1,25二羟基3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA试剂盒 Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA试剂盒 96T/48T
人组蛋白H2b(histon-H2b)ELISA试剂盒 Human histon-H2b ELISA试剂盒 96T/48T
人骨保护素(OPG)ELISA试剂盒 Human Osteoprotegerin,OPG ELISA试剂盒 96T/48T
人骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA试剂盒 96T/48T
下面我们对细胞培养中常见的污染情况,做个总结:
1)原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,zui终形成恶性循环。
2)霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或或或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,或或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
3)细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象! 可在培养液中加相应的抗生素处理
4)黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5)真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
6)支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。 也可以在培养基中事先加入双抗(和氨苄)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1、孵箱应定期用三氧机消毒或者 紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素3、超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水喷洒中和,约几小时即可进入操作。
人环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒 Human Cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA试剂盒 96T/48T
人脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒 Human lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PL-A2 ELISA试剂盒 96T/48T
人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒 Human Endothelial lipase,EL ELISA试剂盒 96T/48T
人横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒 Human skeletal muscle Actinin-α,sm Actinin-α ELISA试剂盒 96T/48T
人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒 Human Bone morphogenetic protein 7,BMP-7 ELISA试剂盒 96T/48T
人25羟基3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA试剂盒 Human 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA试剂盒 96T/48T
人白三烯B4(LTB4) ELISA试剂盒 Human Leukotriene B4,LT-B4 ELISA试剂盒 96T/48T
人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒 Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA试剂盒 96T/48T
大鼠一氧化氮(NO)ELISA试剂盒 Rat nitric oxide,NO ELISA试剂盒 96T/48T
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒 Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA试剂盒 96T/48T
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA试剂盒 Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA试剂盒 96T/48T
人脂联素(ADP)ELISA试剂盒 Human adiponectin,ADP ELISA试剂盒 96T/48T
人组胺(HIS)ELISA试剂盒 human Histamine,HIS ELISA试剂盒 96T/48T
人抵抗素(Resistin)ELISA试剂盒 human Resistin ELISA试剂盒 96T/48T
人骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒 Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA试剂盒 96T/48T
人骨钙素/骨蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒 96T/48T
人骨钙素/骨蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒 Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA试剂盒 96T/48T
所有评论仅代表网友意见,与本站立场无关。